发信人: ke_gd()
整理人: huangzifan(2001-03-24 09:05:39), 站内信件
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虽然这是临床医学上的一个检验项目，但它的原理却是非常地有意思，很精巧，完全上是分子生物学的知识。
HBV DNA就是检验人体内乙肝病毒基因的拷贝数，也就是看体内的病毒量有多少。检验的方法是PCR（Polymerase chain reation)，即聚合酶链式反应。
检验首先当然是先对血清进行HBV DNA抽提，最后得到DNA的悬浮液。这是我们需要的模板。然后以此为模板进行第一次的PCR，这次PCR是不对称扩增，即只对双链的DNA进行单链扩增。
第一次PCR结束后（只有16个循环左右，即普通PCR的一半），再加入另一对带荧光信号的引物，再进行第二次的PCR（反应条件大致同上一次，可以看作是上次PCR的延伸）。这对引物结合时是带荧光信号的，分开后则能量消失。由于反应液内含有大量的单链片段，它们只与带荧光信号的引物中的一条相结合，所以随着反应循环数的增加，反应液内的荧光量也逐渐减少，我们就在每两个循环检测一次荧光量，每次数值的变化是可以通过公式用直线表示出来的，不同浓度的标本都有其特定的直线，不同浓度间的直线是呈平行线关系，浓度越高，则直线出现得越早。通过与标准对照品的直线相比较，我们就可以知道人体内的病毒量是多少了。这种检测方法还是挺灵敏的，重复性也好。 |
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